液相懸浮芯片技術(shù)
液相懸浮芯片是基于熒光編碼微球、雙激光檢測(cè)、應(yīng)用流體學(xué)等多項(xiàng)技術(shù),實(shí)現(xiàn)多分析物共同檢測(cè)的一種技術(shù),又稱為流式熒光技術(shù)或 xMAP(flexible Muti-Analyte Profiling)技術(shù)。
液相懸浮芯片技術(shù)的核心是將直徑 6.5μm 的微球(聚苯乙烯微球或超順磁微球)用熒光染色的方法進(jìn)行編碼,通過調(diào)節(jié)紅色和紅外兩種熒光染料的不同配比獲得可達(dá) 100 種具有不同特征熒光譜的微球,然后將每種編碼微球共價(jià)交聯(lián)上針對(duì)特定檢測(cè)物的抗原、抗體或核酸探針等捕獲分子,當(dāng)這些預(yù)包被的微球與待檢樣本雜交孵育時(shí),目標(biāo)物被微球捕獲后,被用生物素標(biāo)記的特舁性檢測(cè)探針或抗體混合物識(shí)別,加入鏈霉親和素 -PE 熒光素底物(SAPE) 后發(fā)光,并用 Lumine 儀器進(jìn)行信號(hào)讀取,實(shí)現(xiàn)在 96 孔板的每一個(gè)單孔中檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)的研究。
Luminex 200 平臺(tái)
圖 2.Luminex 200 儀器的組成
上海伯豪生物技術(shù)有限公司于 2017 年年初引進(jìn) Luminex 200 儀器,該儀器具有無與倫比的檢測(cè)特異性和靈敏度,可廣泛應(yīng)用于 抗原 - 抗體(蛋白生物標(biāo)志物)免疫分析、核酸研究、酶 - 底物的酶學(xué)研究以及受體 - 配體識(shí)別分析 等研究領(lǐng)域。得到各權(quán)威機(jī)構(gòu)和醫(yī)學(xué)界高度認(rèn)可,是臨床診斷領(lǐng)域以及生命科學(xué)研究中的一大熱點(diǎn)。
技術(shù)特點(diǎn):
1、測(cè)定范圍廣:既能檢測(cè)蛋白,又能檢測(cè)核酸;
2、微量標(biāo)本: 僅需 25μL 樣本 ;
3、高通量檢測(cè):96 孔板,80 個(gè)樣本 / 板 ,單孔上限可檢測(cè) 100 個(gè)指標(biāo) ;
4、樣本類型多樣:培養(yǎng)細(xì)胞、血液或組織(新鮮、冰凍或 福爾馬林固定、石蠟包埋 FFPE 等);
5、檢測(cè)方便:無需抽提核酸或蛋白;
6、高速度:每塊 96 孔板結(jié)果的讀取時(shí)間≤45min;
7、靈敏度高:~1pg/ml
8、線性范圍廣:檢測(cè)范圍達(dá) 3.5 個(gè)數(shù)量級(jí);
9、組合靈活:可個(gè)性化組合檢測(cè)指標(biāo)成定制的試劑盒;
10、低成本:試劑用量少,能有效降低成本。
基于 Luminex 200 的多重核酸定量分析解決方案
QuantiGene? Plex 高通量核酸定量研究系列產(chǎn)品是世界著名基因芯片制造商 Affymetrix 公司旗下 Panomics 的暢銷產(chǎn)品,除了利用 xMAP 技術(shù)外,還整合了西門子授權(quán)并經(jīng)過臨床驗(yàn)證的 branched DNA(bDNA)技術(shù),該技術(shù)可用于 Versant HIV、HBV 以及 HCV 的病毒載量分析,通過信號(hào)放大技術(shù),而非模板放大,bDNA 技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)模板的直接定量檢測(cè)。QuantiGene? Plex 是驗(yàn)證表達(dá)譜芯片和二代測(cè)序數(shù)據(jù)、DNA 拷貝數(shù)檢測(cè)、臨床 FFPE 樣本和血液樣本的多基因檢測(cè)、信號(hào)傳導(dǎo)通路檢測(cè)以及轉(zhuǎn)化研究中生物標(biāo)志物與藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證研究等的理想工具。
試驗(yàn)流程:
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
無需抽提純化 RNA 或 DNA,僅需少量固體或液體樣本;無需反轉(zhuǎn)錄 RNA;無需 PCR 擴(kuò)增,避免引入誤差;
服務(wù)推薦:
1、 單基因表達(dá)高精度定量服務(wù):Affymetrix-Panomics QuantiGene? 2.0 Assay
2、 多重基因表達(dá)定量服務(wù):Affymetrix-Panomics QuantiGene? Plex 2.0 Assay
3、DNA 拷貝數(shù)測(cè)定服務(wù):Affymetrix-Panomics QuantiGene? Plex DNA Assay
注:
1、預(yù)設(shè)計(jì)探針組:Affymetrix 已經(jīng)開發(fā)了龐大的已驗(yàn)證基因的探針庫(kù),超過 1600 種探針組,包括超過 15000 個(gè)基因。預(yù)設(shè)計(jì)探針組覆蓋了廣泛的物種,包括:人類、小鼠、大鼠、犬類、猴、豬、大豆和玉米等諸多物種,任何現(xiàn)有基因的組合都可以整合設(shè)計(jì)新的探針組,要了解新的探針組和基因信息,可訪問 www.panomics.com 或者聯(lián)系我們。
2、 定制探針組:Affymetrix 可針對(duì)任何基因以及任何物種提供定制探針服務(wù)。定制分析組合為 3 -80 plex(RNA)和 3 -33 plex(DNA)。客戶只需提供基因列表、參考序列 ID 或者 DNA 序列,即可在兩周內(nèi)完成設(shè)計(jì)。
樣本要求:
組織:5mg
FFPE 切片:8-10 片
細(xì)胞沉淀: 須告知細(xì)胞個(gè)數(shù)
基于 Luminex 200 TM 的蛋白多因子檢測(cè)解決方案
蛋白層面的多因子檢測(cè)服務(wù),我公司采用 Merck Millipore 公司的 Milliplex 高通量蛋白因子檢測(cè)技術(shù),并與默克建立了“Milliplex 蛋白多因子檢測(cè)服務(wù)合作實(shí)驗(yàn)室”。該技術(shù)又被稱為“高通量 Elisa”,具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值,能夠?qū)⒒A(chǔ)研究獲得的生物標(biāo)志物快速實(shí)現(xiàn)向臨床醫(yī)學(xué)的轉(zhuǎn)化。研究顯示,Milliplex 高通量蛋白檢測(cè)技術(shù)和傳統(tǒng)的 ELISA 方法在檢測(cè)結(jié)果中具有高度一致性,保證了該技術(shù)在臨床檢測(cè)中的準(zhǔn)確性和可靠性。
Milliplex 技術(shù)是免疫研究、腫瘤研究、神經(jīng)研究、內(nèi)分泌和代謝研究、干細(xì)胞研究、心血管疾病研究、毒理和毒性評(píng)估研究、信號(hào)通路研究等的重要工具。
試驗(yàn)流程:
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì) :無需抽提純化蛋白,僅需 25-50μL 樣本,特別適合稀有樣本;檢測(cè) 靈敏度高 ,可檢測(cè)各種體液灌洗液;選擇靈活:提供 Pre-mix 試劑或自由挑選因子組成一個(gè)自選試劑盒的兩種選擇;
服務(wù)推薦:
多因子定量檢測(cè)服務(wù):Merck Millipore-MILLIPLEX? MAP Assays
注:Milliplex 提供超過 8 個(gè)種屬 1500 個(gè)指標(biāo)的選擇,涵蓋腫瘤、免疫疾病、代謝疾病、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、腎毒性、干細(xì)胞、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究等十幾個(gè)熱門研究領(lǐng)域。了解新的 Panel 信息,請(qǐng)?jiān)L問 www.merckmillipore.com 或者聯(lián)系我們。
樣本要求:
血清血漿:50-100μL(實(shí)驗(yàn)僅需 25μL)
細(xì)胞上清液、體液:50μL
默克 Milliplex 試劑盒有較多物種選擇:
默克 Milliplex 試劑盒有較全指標(biāo)選擇:
默克 Milliplex 試劑盒可檢測(cè)較多的研究方向:
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